Escherichia coli é o único coliforme que possui ß-D-glucuronidase e pode ser facilmente diferenciado de outros
coliformes que não apresentam essa atividade enzimática. Existem algumas cepas de E. coli (menos de 3-4% do total
população) que são ß-D-glucuronidase negativos.
E. coli absorve o substrato cromogênico (X-ß-D-glucuronídeo) e a enzima bacteriana ß-D-glucuronidase divide o
ligação entre a fração X cromófora e o ß-D-glucuronídeo.
A fração X livre tinge as células de E. coli e produz uma colônia verde-azulada.
O alto teor de sais biliares do meio inibe o crescimento de bactérias Gram positivas acompanhantes e o alto
temperatura de incubação (44ºC) inibe bactérias Gram negativas que não sejam E. coli